Что такое полимеразная цепная реакция (ПЦР)?
Диагностика COVID-19: обзор основных методов
Почти у всех испытуемых обнаружили устойчивые иммуноглобулины G, которые оставались стабильны в течение как минимум 5 месяцев. Эти данные подтверждает исследование медиков в Иокогаме, о котором рассказал японский телеканал NHK. Они утверждают, что антитела у людей, переболевших СOVID-19, сохраняются как минимум на полгода и уменьшают риск заболеть повторно. Еще через полгода медики планируют проверить участников исследования заново, чтобы узнать, сохранятся ли антитела в течение года. ВАЖНО: даже в случае положительного результата на IgG обязательно соблюдение мер социального дистанцирования и использование средств индивидуальной защиты. Насколько точны тесты на коронавирус? Вот мнение доктора Комаровского Доктор Евгений Комаровский считает, что и ПЦР-тесты, и тесты на антитела нельзя рассматривать как догму. Известный украинский педиатр пишет , что наличие или отсутствие антител еще ни о чем не говорит: можно переболеть коронавирусом и получить отрицательные анализы. Он говорит, что лечение должно в первую очередь зависеть от симптомов, а не от результатов теста. Многие медицинские лаборатории уточняют, что тест для определения антител классов М и G — это вспомогательный метод диагностики COVID-19. Его результат должен интерпретировать врач.
Доктор Комаровский обращает внимание на то, что в США регулярно публикуют данные об ошибочных результатах тестов. Почему не выявляют такие лаборатории и не обнародуют данные? Если результат не всегда верный, зачем вообще сдавать тест на антитела? При невозможности исследования мазков методом амплификации нуклеиновых кислот ПЦР-анализ.
Чем отличается исследование на ковид с помощью ПЦР и экспресс-теста, есть ли разница в точности и насколько верифицируемы результаты? Для начала нужно разобраться в терминологии — само по себе слово «экспресс» в контексте тестирования на коронавирус не имеет определенного значения. Экспресс-тестами могут называться и сравнительно более быстрые ПЦР-анализы, и исследования других типов. Наиболее распространенный метод максимально быстрого тестирования — это так называемые антиген-тесты.
В рамках исследования образец человека наносят на поверхность, которая меняет цвет в случае контакта с антигенами — специфическими частицами коронавируса. Результат можно получить буквально за час или даже через 15 минут — но возникает вопрос точности. Business FM обзвонила три московские лаборатории и попыталась узнать, какой анализ точнее.
Трёхбуквенный вариант — это аббревиатура названия «полимеразная цепная реакция». Собственно, в этом названии и отражается суть метода, но для того, чтобы разобраться, придётся основательно вспомнить школьный курс биологии.
Но сначала — немного истории. Изначально метод использовался в основном для научных целей, но затем, разглядев его перспективность и эффективность, метод стали продвигать в практическую медицину. Кэри Мюллис. В принципе, очень точное описание. Если продолжать сравнение, то игла — это небольшой участок генетического материала микроорганизма, а стог сена — это организм человека, в котором данный микроорганизм поселился.
Что показывает анализ ПЦР Анализ позволяет обнаружить присутствие генетического материала инфекционных возбудителей. ПЦР в гинекологии и в урологии широко применяется для выявления скрытых и труднодиагностируемых инфекций. Принцип работы За генетическую информацию в живом организме любого размера отвечает ДНК — двухспиральная дезоксирибонуклеиновая кислота, состоящая из последовательности четырех нуклеотидов, которые принято обозначать буквами А аденин , Г гуанин , Т тимидин и Ц цитозин. Одно из основных правил генетики — правило комплементарности, то есть нуклеотиды соседних спиралей ДНК соединяются только в определеном порядке: А с Т, Г с Ц, и никак иначе. Рисунок 1.
Схема трех стадий полимеразной цепной реакции. Некоторые виды микроорганизмов, например, вирус иммунодефицита человека, хранят генетическую информацию в другой нуклеиновой кислоте — РНК, но и её фрагменты можно находить с помощью ПЦР. Именно на обнаружении этого небольшого, но уникального для каждого отдельного организма участка и построен принцип ПЦР. Для каждого возбудителя создан свой специфический генетический детектор, эталонный фрагмент ДНК, который по принципу комплементарности точно обнаруживает «свой» фрагмент ДНК и запускает реакцию создания огромного количества его копий.
Типа анализов. Реактивы для количественных ПЦР-тестов более дорогие, а методика сложнее, так что количественные тесты дороже качественных. Чтобы сравнить цены в разных клиниках, мы выбрали один анализ — на гепатит С, для которого берут кровь из вены. Цены указаны с учетом взятия крови. Запомнить ПЦР-тесты помогают обнаружить фрагменты генетического материала бактерий, вирусов или других людей.
Почему "ошибаются" ПЦР-тесты - эксперт
Результат появляется через 20-30 минут. Наибольшую точность тест показывает в первую неделю после заражения. В дальнейшем повышается вероятность получения ложноотрицательного результата. Для уточнения диагноза лучше сделать ПЦР-тест. Анализ на антитела к коронавирусу Анализ на антитела к коронавирусу показывает не присутствие инфекции в организме, а ответ иммунной системы на нее. В ответ на заражение она вырабатывает несколько типов иммуноглобулинов: IgA являются реакцией непосредственно на коронавирус; IgM синтезируются при наличии инфекции в организме указывают на острое течение заболевания ; IgG появляются, когда тело «запоминает» вирус и формирует иммунитет к нему.
Недостаточно, чтобы антитела были просто выявлены. Нужно смотреть и на их комбинацию. Сдать такой анализ нужно, чтобы узнать, вырабатывает ли организм антитела к вирусу, а если да, то сколько. Тесты на антитела Разные виды тестов на антитела к коронавирусу проводятся дома или в лаборатории. В лаборатории берут кровь из вены и выполняют количественную оценку вырабатываемых иммуноглобулинов.
Домашний тест покажет, есть ли антитела в принципе. Сколько их вырабатывается, с его помощью узнать нельзя: для этого требуются познания в биохимии и специальное оборудование для подсчета. В этом случае достаточно капиллярной крови из пальца. Проколоть себе палец может не каждый, поэтому стоит прибегнуть к помощи близких или вызвать медсестру. Анализ сдают натощак.
Поесть можно максимум за 12 часов до забора крови. Диагностику следует отложить при повышении температуры. Что показывает тест на антитела? Наличие иммуноглобулинов означает, что пациент либо болеет сейчас, либо переболел коронавирусом недавно. Если антитела отсутствуют, он либо не заражался никогда, либо микроорганизм попал в тело совсем недавно.
Иммунный ответ формируется до двух недель.
Сдать такой анализ нужно, чтобы узнать, вырабатывает ли организм антитела к вирусу, а если да, то сколько. Тесты на антитела Разные виды тестов на антитела к коронавирусу проводятся дома или в лаборатории.
В лаборатории берут кровь из вены и выполняют количественную оценку вырабатываемых иммуноглобулинов. Домашний тест покажет, есть ли антитела в принципе. Сколько их вырабатывается, с его помощью узнать нельзя: для этого требуются познания в биохимии и специальное оборудование для подсчета.
В этом случае достаточно капиллярной крови из пальца. Проколоть себе палец может не каждый, поэтому стоит прибегнуть к помощи близких или вызвать медсестру. Анализ сдают натощак.
Поесть можно максимум за 12 часов до забора крови. Диагностику следует отложить при повышении температуры. Что показывает тест на антитела?
Наличие иммуноглобулинов означает, что пациент либо болеет сейчас, либо переболел коронавирусом недавно. Если антитела отсутствуют, он либо не заражался никогда, либо микроорганизм попал в тело совсем недавно. Иммунный ответ формируется до двух недель.
Данное исследование не стоит воспринимать как пробу на коронавирус. Если антитела к нему есть, значит, контакт с возбудителем был. Но их отсутствие нельзя однозначно трактовать как избегание вируса.
Наличие антител и прививки Положительный результат описанного исследования еще не гарантирует невозможность повторного заражения. Иммунитет формируется ориентировочно на полгода. Поэтому в регионах, где установлены ограничения, QR-коды выдаются не только привитым, но и переболевшим в течение последних шести месяцев.
Однако присутствие иммуноглобулинов не отменяет необходимость вакцинации. Вопреки распространенному мифу, перед прививкой выяснять их количество не нужно.
Вот экспресс-тесты — там на специальной тест-полоске нанесен реагент, который цвет меняет при взаимодействии с белками, которые специфичны для коронавируса. Для экспрессов оборудование не нужно, но на этом его преимущества заканчиваются. И потом, на самом деле, за пэцээрами ведется очень точный мониторинг, можно всегда отобрать пробирку, из которой была выделена положительная история, проверить ее на другом оборудовании, на другой тест-системе и все прочее.
А экспресс биоматериал не хранит, может показывать разный результат. Поэтому, наверное, он вызывает меньше доверия у власти, и, в принципе, это правильная история». Судя по всему, именно поэтому и для получения кода и похода в ресторан в Москве без прививки и истории болезни, и для отдыха на курортах Краснодарского края при наличии противопоказаний к вакцинации требуется предъявить именно отрицательный ПЦР. Заявленная чувствительность экспресс-теста может быть такой же, как у полимеразной цепной реакции, но реальная клиническая точность метода может оказаться любой — и это никак не проверить.
Он позволяет определить даже очень небольшое количество РНК вируса в биологическом материале человека. Это помогает выявить болезнь в инкубационном периоде. Изобретенный в 1983 году метод и сейчас считается фундаментальным в молекулярной диагностике. Американский ученый, который придумал способ значительного увеличения малых концентраций фрагментов ДНК в биологической пробе, получил за него Нобелевскую премию. Метод используют в археологии, криминалистике, генетике.
Как работает ПЦР-тест Для анализа из физиологических жидкостей извлекают одноцепочечную РНК, моделируют на ее основе двуцепочечную ДНК и многократно дублируют с помощью специального фермента полимеразы. Увеличение числа копий ДНК называется амплификацией. При исследовании копируется только необходимый для теста участок ДНК. И, конечно, дублирование происходит только в том случае, если искомый участок вирусной ДНК или РНК присутствует в исследуемом биоматериале. В случае с коронавирусом мазок для анализа берут из ротоглотки или носоглотки, поскольку в крови или в кале вирус появляется на более продвинутой стадии болезни. Эти тесты были разработаны «Вектором» уже в начале января, основываясь на имеющихся данных о вирусе. Центр производит 500 тыс. По данным производителя, он поставляется в 15 крупнейших диагностических лабораторий страны: в том числе в частные лаборатории «Хеликс» и «Гемотест». Российско-японские тесты 20 марта Росздравнадзор дал разрешение на использование российско-японской диагностической системы по выявлению коронавируса, которую вывела на российский рынок компания «Эвотэк-Мирай Геномикс» EMG.
Инвестором проекта выступил Российский фонд прямых инвестиций. Российско-японская технология для экспресс-диагностики COVID-19 является совместной разработкой японской компании «Mirai Genomics» и ее российского партнера «ООО «Генетические технологии», которая представляет собой как непосредственно тесты, так и портативные диагностические системы. Российско-японская разработка позволяет осуществлять высокоточную экспресс-диагностику вируса максимум за 30 минут. Благодаря тому, что технология адаптирована под мобильные лаборатории, она позволяет тестировать людей где угодно и может обрабатывать образцы сразу 20 человек. Тест-система EMG — продукт совместной разработки российских и японских разработчиков, проводившейся с 2016 года, рассказывает Олег Гусев.
Чем ПЦР отличается от антител и какой анализ россиянам нужно сдавать при подозрении на ковид?
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал. С июля в Москве экспресс-тестирование на антиген к COVID-19 вместе с ПЦР-тестом проводили в тестовом режиме. ПЦР-тест представляет собой наиболее эффективный метод тестирования при диагностике вирусных инфекций. Если тест на антитела дал отрицательный или неоднозначный результат и остались сомнения, то рекомендуется провести ПЦР-тест, так как именно этот метод позволяет выявить инфекцию на ранней стадии.
ПЦР-тестирование: как работает метод ПЦР в диагностике
и ПЦР-тесты показывают только сам факт наличия коронавируса, но не устанавливают его штамм, заявил «» заслуженный врач РФ Михаил Каган. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет выявить вирус SARS-Cov-2 – возбудителя COVID-19 в биологических материалах (мазках из горла, рта, носоглотки, в мокроте). ПЦР или полимеразная цепная реакция является золотым стандартом в диагностике многих инфекций.
ПЦР-тест на коронавирус: что показывает и как делают
У меня есть случаи, когда пациент был два с половиной месяца ложноположительный по ПЦР, это было в первую волну. И представляете, он измучился, не мог с карантина выйти Антон Ершов Доктор медицинских наук, практикующий врач, профессор По словам практикующего врача, понять, что результат теста ложноположительный, можно на двух основаниях: отсутствие каких-либо симптомов болезни и как минимум два отрицательных ПЦР-теста в следующие несколько дней. Просто делаем нормальную санацию слизистой, очищаем её от этого всего, промываем и так далее — и потом дважды пациент ПЦР сдаёт, и он отрицательный Антон Ершов Доктор медицинских наук, практикующий врач, профессор Кроме того, иногда тест находит ковидные РНК у здорового человека в тот момент, когда вирус только что оказался на слизистой оболочке и ещё не успел там обосноваться, добавил профессор. Я вакцинирован, причём с хорошим титром, и не заражусь.
Поэтому за 4 часа до его начала нужно отказаться от еды и воды. Их недавнее употребление нередко приводит к ложноотрицательному результату из-за слущивания эпителия, где успел размножиться коронавирус. Чистка зубов и ополаскивание рта тоже под 4-часовым запретом.
Средства гигиены временно избавляют полость рта от следов вируса, которые ищет ПЦР-анализ. От спреев для носа и горла тоже придётся отказаться. Антисептические свойства алкоголя исключают его употребление перед тестированием.
Роспотребнадзор предлагает отказаться от спиртного за двое суток до ПЦР. Забор материала может быть не самым приятным процессом. Инструмент медика скользит по глотке пациента в течение нескольких секунд, пока не наберётся достаточно материала.
Антитела IgM и IgG Помимо ПЦР-исследования, существуют дополнительные методы диагностики, которые помогают уточнить стадию инфекции или узнать, что человек уже ее перенес. К ним относятся тесты на иммуноглобулины, или антитела — особые белки, которые организм вырабатывает в ответ на встречу с чужеродными агентами, в том числе вирусами и бактериями. При большинстве других инфекций сначала вырабатываются антитела класса IgM — они помогают бороться с инфекцией на начальных этапах и обнаруживаются в крови в период от пяти до семи дней после заражения. Их концентрация максимальна в острый период заболевания. Присутствие IgM в крови может говорить о том, что человек заражен прямо сейчас. Ближе к концу второй недели подключатся антитела класса IgG. Благодаря им организм «запоминает» врага на случай новой встречи.
Эти антитела сохраняются долгое время после выздоровления. Новая коронавирусная инфекция ведет себя непредсказуемо. При ней антитела обоих классов часто обнаруживаются в крови зараженных людей почти одновременно, причем IgG могут начать выявляться даже раньше.
Количественный анализ — способ определения вирусной нагрузки на организм. Он также может быть проведен двумя методами: определением количества частиц вируса в крови или методом ПЦР. Данный вариант показан для выявления стадии инфекции, например, перехода острой формы гепатита С в хроническую, а также для контроля эффективности лечения заболевания.
Анализ на вирусную нагрузку не заменяет другие необходимые исследования, так как не показывает стадию повреждения печени и тяжесть течения болезни. Для определения этих показателей необходимы биохимическое исследование крови и биопсия тканей печени.
Дискриминация «экспресс-тестов»: почему власти признают только ПЦР?
Экспресс-тест показывает только наличие или отсутствие антител (кровь берется из пальца). Он показывает иммунный ответ организма (наличие антител M и G) и их уровень. ПЦР (полимеразная цепная реакция) – метод, который позволяет выявить присутствие вируса в организме. Для исследования берется мазок из носа и ротоглотки. Тест ПЦР (полимеразной цепной реакции) позволяет обнаружить ДНК вируса в генетическом материале пациента. Рекордсменом по популярности заслуженно выступает так называемый комплексный анализ ПЦР 12 – он называется так потому, что включает в себя 12 наиболее распространённых половых инфекций, а также контрольный тест на качество взятых материалов (КВМ).
COVID-19: чем ПЦР отличается от антител и какой анализ нужно сдавать
Затем в лабораторных условиях образец размножается и анализируется. ПЦР - более чувствительный тест, чем исследование на антиген, поскольку он может обнаружить одну молекулу РНК в микролитрах раствора. В настоящее время это золотой стандарт диагностики коронавируса. Прежде всего, это высокая чувствительность, т. Во-вторых, тест также высокоспецифичный точный , то есть сводит к минимуму риск ложноположительных результатов правильно определяет здоровых людей.
Еще одно преимущество метода - скорость и повторяемость.
Плеер автоматически запустится при технической возможности , если находится в поле видимости на странице Адаптивный размер Размер плеера будет автоматически подстроен под размеры блока на странице. Его берут из носовой пазухи — места наибольшей концентрации вируса. В случае ПЦР биоматериал берут дважды, через нос и через рот, смешивают с физраствором и отправляют в лабораторию.
Затем для получения точного результата к нему добавляются праймеры фрагмент нуклеиновой кислоты и состав исследуется в лабораторных условиях.
Кому рекомендуется диагностика LAMP? Тем, кто контактировал с лицами, больными Covid-19, а также людям, входящим в группу риска например, пожилым людям и тем, у кого имеются тяжелые хронические заболевания. Через сколько будут известны результаты? В течение 20-40 минут. Метод LAMP на данный момент не применяется в государственных лабораториях.
Однако его используют в частных клиниках для подтверждения результатов экспресс-тестирования. Насколько точно исследование LAMP? Данные об эффективности этого метода диагностики отсутствуют. Однако, по мнению многих специалистов, его точность схода с методикой полимеразной цепной реакции ПЦР. Какой способ диагностики лучше?
Все методы, применяемые для выявления Covid-19, успешно применяются в диагностике заболевания. Они отличаются по методу и показаниям к проведению, а также по длительности получения результатов. Однако применяются в разных случаях, поэтому имеют равную эффективность. Если вы находитесь в тесном контакте с человеком, болеющим коронавирусом, рекомендуется ПЦР-исследование. В отличие от остальных методик оно занимает больше времени, но позволяет получить максимально точные данные.
Если вы хотите узнать, переболели ли уже Covid-19, рекомендуется экспресс-тест на антитела. Он занимает минимум времени и позволяет узнать, на какой стадии развития находится заболевание, и переболели ли вы им раннее например, если коронавирус прошел в бессимптомной форме. Если вы входите в группу риска заражения Covid-19, рекомендуется экспресс-тест на антитела или исследование LAMP.
IgM обнаруживаются в анализе на 7-10 день после инфицирования с 5-го дня появления клинических признаков заболевания и остаются в организме до двух месяцев. Поскольку иммуноглобулины начинают вырабатываться не с первого дня инфицирования, то и тест на антитела сначала может быть отрицательным, ведь исследование может проводиться в период, когда организм еще не успел сформировать иммунный ответ. Логично обнаружить IgM в разгар заболевания и сразу после регресса симптоматики.
IgG вырабатываются позже, примерно с 21-28 дня от момента заражения, и сохраняются в организме более продолжительное время, в течение нескольких месяцев или лет. Следовательно, обнаружить их удастся только на стадии выздоровления или в более поздние сроки. По наличию и уровню IgG в крови можно судить, как о факте перенесенной инфекции в прошлом, так и определить наличие специфического иммунитета к данному возбудителю. Какой способ диагностики лучше? Учитывая, чем отличается ПЦР от антител на КОВИД, разницу в данных исследованиях, нельзя однозначно определить, какой способ диагностики является предпочтительным. При наличии контакта с заболевшим человеком или инфицированным, а также в случае наличия симптомов, укладывающихся в картину коронавируса, рекомендуется ПЦР-диагностика в клинике в Перово.
ПЦР или тест на антитела к коронавирусу. В чём разница?
В случае ПЦР биоматериал берут дважды, через нос и через рот, смешивают с физраствором и отправляют в лабораторию. Все исследование занимает около трех часов, рассказывает технолог подразделения молекулярно-генетических исследований лаборатории Маргарита Абрамова. Если результат положительный — его повторяют, и только в случае двойного положительного результата пациенту сообщают о болезни.
В группе риска пожилые люди Голикова доложила Путину тревожные цифры по росту числа смертей от коронавируса в России Матвиенко допускает введение более строгих ограничений в регионах из-за коронавируса Ещё 248 новости Тест на основе полимеразной цепной реакции — один из самых чувствительных инструментов лабораторной диагностики.
В его основе — многократное копирование генетического материала. Оно позволяет узнать о наличии даже небольших его частиц в исследуемом образце. Это могут быть микроскопические остатки слюны, крови или даже древние кости.
Поэтому ПЦР-анализ часто используют в криминалистике. Зато он с большой вероятностью займёт верхние дыхательные пути, что позволит найти его на слизистых оболочках носоглотки и зёва. Именно по ним медик проводит длинной «ватной палочкой», собирая материал.
Изнутри носоглотка и ротоглотка выстланы эпителием — слизистым покровом, клетки которого часто меняются. Снимает их заглатываемая пища и напитки.
На пятый день обычно появляются первые симптомы COVID-19 — и тут уже почти две трети тестов показали правду. Еще через трое суток лишь пятая часть результатов была ложной, а далее вероятность правдивости теста начала падать. Через три недели после начала заражения две трети проверок дали отрицательный результат. Таким образом, это может быть оптимальным временем для тестирования, если цель — минимизировать ложноотрицательные результаты», — сообщили авторы исследования. Конечно, далеко не все больные точно знают, когда подхватили вирус, зато назвать момент первых признаков недомогания может почти каждый.
Накануне приказ об этом подписал руководитель Департамента здравоохранения столицы Алексей Хрипун. Четвёртая волна COVID-19 в России неизбежна Сейчас у нас есть возможность определить это экспресс-методикой, мы можем поставить предварительный диагноз сразу, а значит, и сразу назначить терапию, определить схему лечения и выдать лекарственные препараты. Поэтому пациент сможет начать лечиться прямо в день обращения за помощью, не тратя времени на получение информации, чем вызвано его недомогание. Итоги эксперимента показали, что в 85 процентах случаев результат обоих методов совпадал. Почему результат ПЦР и экспресс-теста не всегда оказывается одинаковым?